葡萄糖在农作物的功效篇1
关键词西兰花；硫代葡萄糖苷；结构；生物学功能；抗癌；抗氧化
中图分类号R151文献标识码a文章编号1007-5739（2014）07-0295-01
西兰花是十字花科中的一个变种，含有大量的抗氧化物质如黄酮类、多酚类和维生素物质，也含有丰富的人体必需的营养素，同时还含有抗癌物质硫代葡萄糖苷，可以起到预防前列腺癌、胃肠道癌、肺癌的作用[1-3]。现对西兰花中硫代葡萄糖苷的结构和生物学功能研究进展进行概述。
1硫代葡萄糖苷的结构与含量
硫代葡萄糖苷是西兰花重要的次生代谢产物。硫代葡萄糖苷的分子结构由2个部分组成，β-D-葡萄糖部分（简称葡萄糖部分）和非糖部分[4-5]。二者通过硫苷键相连，硫代葡萄糖苷的基本结构如图1所示。
硫代葡萄糖苷既无毒性也无生物活性，在内源芥子酶作用下可水解为具有不同生理功能的活性物质[6]。西兰花中硫代葡萄糖苷含量一般在500～2000μg/g，种类为5种以上。不同品种、同一品种的不同生长期或者同一株西兰花的不同部位，硫代葡萄糖苷的含量变化都很大。其在嫩芽中的含量是成熟植株或花中含量的10～100倍。
2硫代葡萄糖苷的生物学功能
2.1硫代葡萄糖苷的抗癌功能
西兰花中含有的异硫氰酸盐类可以抗氧化、延缓衰老，并且有非常强的抗癌防癌作用，在西兰花中含量最多的莱菔硫烷为异硫代氰酸盐衍生物，是目前发现的在蔬菜中含有的预防癌症最好的物质之一，其在十字花科中广泛存在，其抗癌机理比较复杂，可能是多种机制联合作用的结果。另外，不同的异硫代氰酸盐物质其防癌抗癌的作用方式也千差万别，如2-丙烯基异硫代氰酸盐是通过促进阶段酶的体内脱毒，丙烯基异硫代氰酸盐是通过抑制癌细胞原的形成，而莱菔硫烷的作用机理为诱导体内阶段Ⅱ酶起到抗癌的作用。综合目前研究表明，这些在十字花科植物富含的硫代葡萄糖苷通过调节生物转化酶的表达和活性来起到抗癌、防癌的作用[7-8]。
在体内、体外致癌模型中，异硫氰酸酯和吲哚-3-甲醇可在癌症发展的起始和促进阶段影响癌的发生。季宇彬、邹翔等对青花菜中异硫氰酸盐的抗癌机制进行了研究，试验结果显示，青花菜中异硫氰酸盐对人肝癌细胞HepG-2和人胃癌细胞SGC-7901有较强的抑制作用，能促进HepG-2细胞凋亡，且对S180实体瘤的生长具有显著的抑制作用。对其作用机制也有了初步的了解。从西兰花花蕾中分离出来的抗癌活性成分进行研究，发现日常食用的绿色蔬菜中含有抗癌活性成分，可以通过日常饮食的摄入达到防癌的目的[9-11]。
2.2硫代葡萄糖苷的抗氧化功能
西兰花中的葡糖异硫氰酸盐可以转化成为莱菔硫烷，继而通过调节谷胱甘肽硫转移酶、硫氧还蛋白还原酶等进行脱毒和抗氧化。莱菔硫烷本身并不直接参与还原反应，它导致的氧化应激会激活转录因子nrf2（nF-e2-relatedfactor2）活性，起到产生活性氧、二相酶和抗氧化酶等一系列细胞应激反应，提高细胞抗氧化能力，并且这种抗氧化能力具有一定的延续性，在一段时间能持续存在，因此莱菔硫烷可以产生持续时间较久的抗氧化能力。
西兰花茎叶抗氧化作用可能与其富含的活性成分类胡萝卜素、葡萄糖异硫氰酸盐等密切相关，这些物质能够清除自由基和阻断过氧化链式反应的进行，在一定程度上提高机体的抗氧化性能。任丹丹等报道类胡萝卜素可以提高小鼠肝脏中超氧化物歧化酶活性，降低丙二醛含量。同时，西兰花含有的多种酚类物质，可捕获过氧化自由基，阻断过氧化链式反应的进行，提高机体的抗氧化效果。类黄酮和维生素C可促进人体α-生育酚和维生素e的再生，槲皮素和山奈酚是西兰花中主要的类黄酮物质。黄酮类化合物是有效的体外抗氧化剂，可以清除自由基的活性，并且增强抗氧化酶活性[12]。
3结语
西兰花硫代葡萄糖苷及其降解产物的抗氧化、抗衰老和抗癌功能越来越受到研究者和消费者的重视。但西兰花化学成分中报道最多为萝卜硫素的分离制备方法和功能研究，其他的硫代葡萄糖苷成分报道较少。而且对于萝卜硫素的提取、分离工艺并不成熟，很难实现工业化。因此，西兰花硫代葡萄糖苷类物质的提取、分离工艺将是以后研究的首要工作。
4参考文献
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葡萄糖在农作物的功效篇2
（宁夏大学，a.葡萄与葡萄酒教育部工程研究中心；b．农学院，银川750021）
摘要：以5年生玫瑰香葡萄（Vitisviniferacv．muscat）为试验材料，研究了抗重茬微生态滴灌肥对葡萄叶片光合日变化特性、叶片养分和果实品质及产量的影响。结果表明，微生态滴灌肥能提高葡萄叶片胞间二氧化碳浓度、气孔导度、蒸腾速率以及净光合速率，且有明显日变化；叶片全n、全p、全K含量比对照提高；叶绿素a、叶绿素b也比对照提高，延缓叶片衰老；还可以显著提高叶片糖分含量，促进有机物积累及运转；果实可溶性固形物、总糖、还原糖、维生素C、色素含量提高，有机酸含量降低；果实横径、纵径分别提高了17.4％、14.1％；同时产量也提高23.1％。抗重茬微生态滴灌肥对葡萄叶片养分和果实品质及产量有显著影响，可促进葡萄的营养生长，提高产量且改善品质。
关键词：玫瑰香葡萄（Vitisviniferacv．muscat）；滴灌肥；果实品质；产量
中图分类号：S663．106．2文献标识码：a文章编号：0439－8114（2015）01－0048-05
Doi：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.01.012
applicationofanti－continuousCroppingmicrofloraDripirrigationFertilizer
inmuscatGrapes
RenLeia，b，Jinweib，XiaoDong－minga，b，mawen－tinga，b，SUnQiana，b，wanGZhen－pinga
（a．GrapeandwineeducationDepartmenttechnologyResearchCenter；
b．Schoolofagriculture，ningxiaUniversity，Yinchuan750021，China）
abstract：tostudytheeffectsofanti－continuouscroppingmicrofloradripirrigationfertilizeronphotosyntheticdiurnalvariation，leafcontentinleaves，fruitqualityandyield，experimentwasconductedwith5－year－oldmuscatgrapes．theresultsshowedthatmicrofloradrioirigationfertilizerincreasedintercellularCo2concentration，stomatalconductance，transpirationrateandnetphotosyntheticrateofgrapeleaveswithsignificantdiurnalvariation.itincreasedtotalnitrogeningrapeleaf，contentofphosphorusandpotassium.Chlorophyllaandchlorophyllbofleaveswereincreased.Senescencewasdelayed.itsignificantlyincreasedthecontentofsugarinleavestopromoteorganicaccumulationandmigration.tSS，solublesugarcontent，reducingsugar，vitaminC，pigmentscontentoffruitwereincreasedandtheorganicacidcontentwasdecreased.traversediameter，longitudinaldiameterofgrapeberryincreased17.4％and14.1％，respectively.theproductionwasincreased23.1％comparedwiththecontrol．itisindicatedthatanti－continuouscroppingmicrofloradripirrigationfertilizerhasasignificantimpactsonthequalityoffruit，canimprovetheutilizationrateofmineralnutrientandincreaseproduction．
Keywords：muscatgrape（Vitisviniferacv．muscat）；dripirrigationfertilizer；fruitquality；yeild
收稿日期：2014－03－18
基金项目：国家现代农业产业技术体系建设项目（CaRS－30）
作者简介：任磊（1988－），女，陕西渭南人，在读硕士研究生，研究方向为葡萄栽培与葡萄酒酿造，（电话）18795206251
（电子信箱）Rlily413＠163．com；通信作者，王振平（1965－），男，教授，博士，硕士生导师，主要从事葡萄栽培与葡萄酒酿造研究，
（电话）13895677292（电子信箱）wangzhp＠nxu．edu．cn。
葡萄（Vitisvinifera）在世界果树生产中占有重要位置，其栽培面积和产量仅次于柑橘，位居第二［1］。其对气候和土壤有较强的适应性，加之结果早，易丰产，效益高，广泛栽植在世界各地。葡萄肉质多汁甘甜，风味优美，且营养价值很丰富。其性味甘、酸、平，入肺、脾、肾经，有补气血、强筋骨、滋肾益肝等疗效。其用途很广，各种副产物可以得到综合利用，创造更多的经济效益，深受大家的喜爱。
葡萄属落叶藤本植物，在同一地块常年连作（这种方式称重茬或连作）。由于常年在重茬环境生长，田地病虫害逐年增加，土壤中真菌和细菌等病原微生物大量繁殖，有机质、磷、钾、微量元素等逐年递减引起作物缺素，使根系产生有毒物质，造成植物生长不良且易发病，尤其是枯萎病、叶枯病、病毒病等病害，随之而来的土传病害等重茬病造成作物大面积减产。土壤微生物平衡遭到破坏，根系小，生长弱，生产中常出现缺苗，产量和品质明显下降，肥料施用量增加［2］。加之贺兰山山前洪积的灰钙土，土壤母质主要由洪积冲击物组成，质地粗，富含沙砾，葡萄根系很难深扎，根系分布面积广而浅，出现漏肥漏水［3］，土壤肥力下降，造成越冬死亡或缺苗现象，导致葡萄产量低，成为葡萄高产优质栽培的主要障碍，严重影响葡萄的经济效益。抗重茬剂普遍适用于其他果树上，但目前在葡萄上应用甚少。抗重茬微生态滴灌肥含有来源于葡萄的具有促生防病抗重茬功能的内生芽孢杆菌、木霉菌等有益微生物，经过高效微生物发酵和制剂加工工艺制备而成。通过调控葡萄根际土壤和根内的微生态系发挥作用，改善微生物群落结构，提升有益微生物的种群数量，达到促进根系生长，抗重茬，预防土传病害，增加产量和改善品质等功效，可以补充土壤有机质，平衡土壤肥力，进而改善葡萄树体营养结构，提高果实品质及产量。针对重茬危害现象，通过抗重茬微生态滴灌肥处理，旨在推广防止葡萄常年耕作障碍的简便通用措施。
1材料与方法
1．1试验地概况
试验设在宁夏大学玉泉营葡萄基地（葡萄基地属于贺兰山东麓、东经105°45’39”－106°27’35”，北纬37°43’00”－39°05’03”之间核心区域）。供试土壤基本理化性质见表1。
1．2供试材料
供试抗重茬剂：抗重茬微生态滴灌肥由中农绿康（北京）生物技术有限公司与中国农业大学合作研制，主要技术指标为有效活菌数≥5．0亿个／mL。
供试葡萄品种：5年生玫瑰香，东西行向种植，株行距为1．0m×3．5m，土壤为沙土。葡萄生育期间，各项栽培管理措施一致，无病虫害发生。
1．3试验设计
试验采用完全随机区组设计，处理：抗重茬微生态滴灌肥，对照：清水。在葡萄发育4个重要时期即萌芽期、幼果膨大期、浆果转色期、果实成熟期各滴灌一次（每次5kg／667m2）；以清水作对照，滴灌量保持一致（表2）。每个处理设置3个小区，随机排列。葡萄成熟期采样，分别从各处理的葡萄植株上、中、下3个部位的果穗上采取大小均匀的果实，一个处理采60粒，液氮速冻后带回，贮藏于－85℃冰箱中备用。
1．4测定项目及方法
1．4．1光合特性相关指标的测定采用日变化研究，在葡萄转色一周后使用便携式光合仪（GFS－3000，德国wale公司）测定，于9：00、11：00、13：00、15：00、17：00测定各处理叶片。每处理测定3株，每株测定3片叶子，叶片应选坐果位前一片功能叶。测定参数有：净光合速率（pn）、胞间Co2浓度（Ci）、气孔导度（Gs）、蒸腾数率（tr）。叶面积大小一致，均来自树体中部，对所测叶片进行挂牌标记，确保每次测定叶片是同一叶片。
1．4．2叶片养分以及叶绿素的测定叶片采样时间和果实一致，每个处理随机选取树体中部新梢成熟叶5～8片，先在体积分数10％的HCl溶液浸泡30s，后用去离子水冲洗干净，自然风干。再置于烘箱中，在105℃的温度下杀青2h，于60℃下烘干，经粉碎后，测定叶片养分含量［4］。
全氮测定采用H2So4－H2o2消煮蒸馏法［4］；全磷的测定采用钒钼黄比色法［4］；全钾的测定采用火焰光度计法［5］。用SpaD－502叶绿素仪测量中部成熟叶片的叶绿素含量。
1．4．3果实生长和品质及产量的测定果实纵、横径使用电子游标卡尺测定，并计算其果形指数；可溶性固形物含量采用wYt24型手持糖度计测定；果实可溶性糖含量采用蒽酮硫酸比色法测定［6］；还原糖用3，5－二硝基水杨酸法测定；有机酸含量采用naoH滴定法测定［7，8］；VC测定采用2，6－二氯靛酚滴定法［9］；色素采用杨夫臣等［10］的葡萄色素提取的改进方法测定。百粒重采用分析电子天平测量；葡萄采收时一次性测定各小区的产量，并折合成每667m2产量。
1．5数据统计分析
用execl和DpS软件进行数据统计分析、差异显著性分析和新复极差法（SSR法）多重比较。
2结果与分析
2．1微生态滴灌肥处理对玫瑰香葡萄光合特性的影响
由图1可知，葡萄进行微生态滴灌肥处理后，处理间净光合速率具有明显差异性。微生态滴灌肥处理的pn始终高于CK；CK的pn在9：00时达到最大值，为2．85μmol／（m2·s），此后呈持续下降趋势。微生态滴灌肥处理的pn随着气温升高和光合有效辐射增大而逐渐增大，在11：00左右达到最大值3．19μmol/（m2·s），11：00~15：00时，由于温度急剧上升，湿度达到最低值，引起光合午休现象，导致pn快速下降；15：00－17：00时，虽然温度下降，但光合有效辐射下降较小，pn下降速率减缓并没有回升。表明微生态滴灌肥可以增强净光合效率，加快光合产物的积累。
图2表明，植株夜间进行呼吸作用使得清晨胞间Co2浓度（Ci）达到最高；随着光照度的增加、温度升高，蒸腾作用加剧、光合作用逐渐加强［11］，消耗大量自由水，空气相对湿度逐渐降低，使得Ci不断降低，在13：00左右达到最低值，之后逐渐上升。进行微生态滴灌肥处理的葡萄Ci始终高于CK，表明微生态滴灌肥能增加光合原料（Co2），促进光合作用进行。
由图3可知，各处理间葡萄的气孔导度（Gs）日变化具有明显的差异。不同处理的气孔导度（Gs）呈下降趋势。微生态滴灌肥处理的Gs始终高于CK，在9：00－15：00时，微生态滴灌肥处理的Gs缓慢降低，15：00之后急速降低；CK的Gs在9：00－15：00时降低，13：00－15：00略有上升，15：00之后急速下降。微生态滴灌肥可以促进气孔的开放，促进气体的交换。
蒸腾是植物保持体内水分代谢平衡、营养物质的传输和吸收的重要途径［12］。植物蒸腾受光照度、温度、湿度、土壤水分供应、叶片气孔阻力等各种因子的影响。由图4看出，各处理间葡萄的蒸腾速率（tr）日变化具有明显的差异。微生态滴灌肥处理的tr始终高于CK，CK的tr日变化幅度不明显。微生态滴灌肥处理的tr在9：00~13：00逐渐升高，在13：00左右达到最大值2．65mmol／（m2·s），13：00之后tr开始下降。说明微生态滴灌肥能促进气孔导度逐渐增大，叶片tr不断增大，并且在正常栽培管理下，蒸腾速率随光照度上升而较快上升。
综上所述，抗重茬微生态滴灌肥能提高土壤保水保肥能力，促进葡萄叶片生长发育，提高光合利用率，增加光合强度，有利于干物质的积累。
2．2微生态滴灌肥处理对玫瑰香葡萄叶片养分以及叶绿素的影响
从表3可以看出，经微生态滴灌肥处理后，可以显著提高叶片全n、全p、全K含量；对叶片中叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素无显著影响，但在田间观察发现经微生态滴灌肥处理后，叶片色泽浓绿且肥厚，叶面积大。说明微生态滴灌肥可以改善根系环境，提高水肥利用率，增强其趋肥性；同时叶片总糖的含量也显著提高，利于营养物质积累。
2．3微生态滴灌肥处理对玫瑰香葡萄果实生长的影响
由表4看出，与对照相比，经微生态滴灌肥处理的葡萄果实横径、纵径均有不同程度的增加，分别增加了17．4％和14．1％，其中果实横径、纵径差异显著，但果形指数微生态滴灌肥处理略低于CK。说明微生态滴灌肥可以增大果实，从而提高其商品性。
2．4微生态滴灌肥处理对玫瑰香葡萄果实品质的影响
葡萄的含糖量、含酸量、酚类物质、芳香物质的种类及含量是影响葡萄果实品质的主要因子［13］。可溶性固形物是糖酸等固体物质的总和，由表5可以看出，经微生态滴灌肥处理的葡萄果实中可溶性固形物显著高于对照，比对照提高了27.9％。由此说明微生态滴灌肥可以提高果实可溶性固形物含量。
葡萄果实中糖含量是除水分外含量最高的物质，一般为15％~25％［14］，由表5可知，经微生态滴灌肥处理的葡萄果实总糖和还原糖含量显著高于对照。说明微生态滴灌肥能促进葡萄果实糖分积累。
有机酸是判断果实成熟度的重要品质指标之一。由表5可知，经微生态滴灌肥处理的葡萄成熟期果实中有机酸含量显著低于对照，说明微生态滴灌肥能降低果实有机酸含量，使其提早成熟。
VC是衡量葡萄营养价值的重要指标，其含量高低决定葡萄营养价值和口感，进而影响葡萄的商品价值［15］。由表5可知，处理间VC含量差异显著，微生态滴灌肥处理葡萄果实VC含量比对照提高了23.3％。说明微生态滴灌肥可增加葡萄果实VC含量，提高果实营养价值。
葡萄果实的着色状况对其商品性影响很大，研究表明，花青素是果实呈现红色的主要色素，其含量是决定葡萄着色程度的主要指标。由表5可知，经微生态滴灌肥处理的葡萄成熟期果实中色素显著高于对照，比对照提高43.2％。说明微生态滴灌肥能促进葡萄果实色素积累，使其着色均匀，提高商品价值。
2．5微生态滴灌肥处理对玫瑰香产量的影响
由表6可知，微生态滴灌肥处理可显著提高葡萄百粒重，比对照增加60g；微生态滴灌肥处理可显著提高产量，比对照高145．2kg/667m2，产量提高了23.1％。在田间观察发现经微生态滴灌肥处理的葡萄转色期提前1周左右，成熟期提早2周左右，使其提早上市，提高葡萄的经济效益。
3结论与讨论
施用抗重茬微生态滴灌肥对净光合速率和蒸腾速率有很大的影响，均表现为微生态滴灌肥处理高于对照，具有明显日变化。本研究结果表明，微生态滴灌肥能提高土壤保水保肥能力，促进气孔导度逐渐增大，促进气孔的张开，促进气体的交换，增加光合原料（Co2），促进葡萄叶片生长发育，提高光合效率，增加光合强度，有利于干物质的积累。有研究表明，施用抗重茬微肥可以提高设施番茄的光合作用，本试验结果与此一致。处理对叶片叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素无显著性影响，可以显著提高叶片全n、全p和全K含量，还可以显著提高叶片总糖的含量，施用抗重茬微生态滴灌肥后，其产生多种酶，比如蔗糖酶、脲酶、磷酸酶等，促使大量无机矿质元素源源不断地由下往上输导，促进葡萄地上部分营养合成。
施用抗重茬微生态滴灌肥可以增加果实可溶性固形物的含量、总糖含量、还原糖含量、VC含量和色素含量，降低有机酸含量，主要是因为微生态滴灌肥可以提高葡萄叶片净光合速率，光合能力的强弱可以反映植物对有机营养物质的积累能力［16］，光合能力越强，有机营养积累越多，葡萄品质越好。所以施用抗重茬微生态滴灌肥能提高葡萄营养价值，改善葡萄果实综合品质。
施用抗重茬微生态滴灌肥可以增加葡萄的果实横径、纵径，还可以提高百粒重。主要是因为微生态滴灌肥中含有大量芽孢杆菌，芽孢杆菌在繁殖过程中产生大量的琥珀酸，在琥珀酸的作用下，土壤分解出大量的钾、磷、钙等离子被植物根系吸收，而且还产生一些有益微生物，丰富土壤微生态环境，促进葡萄根系生长发育，提高了肥料的利用率；微生态滴灌肥还能促进营养互补、丰缺平衡，使植株健壮，增加果实百粒重［17］，达到高产的效果，提高其商品价值。在田间观察发现经微生态滴灌肥处理的葡萄转色期提前1周左右，成熟期提早2周左右，使葡萄提早上市，提高经济效益。
葡萄生产常年重茬种植，一直困扰着贺兰山东麓葡萄产区的种植户，导致这一现象的主要原因一方面是土壤中有益菌群的减少、有害菌群的增加、毒素积累以及线虫的增加，致使一些致病菌等有害物质大幅度蔓延，导致葡萄根系的微生态环境被破坏；另一方面是常年使用单一无机肥料，造成土壤营养元素严重失衡，尤其是一些含量少的微量元素。抗重茬微生态滴灌肥在一定程度上可以缓解这种状况，连年使用可有效防止连作障碍。
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葡萄糖在农作物的功效篇3
生活中的“全食族”其实并不少见，台湾明星蓝心湄就是其中之一。她喜欢“全食”的食物之一便是带皮的猕猴桃，并且带动了不少台湾明星加入这个行列。带皮吃猕猴桃的原理是为了增加粗纤维的摄入，刺激肠蠕动，从而达到改善便秘的目的。
“全食物”作为一种饮食文化最早兴起于西方，并逐步向全世界扩张。按照全食理念，如今人们全都在糊里糊涂糟蹋食物。吃蔬菜只吃菜叶不吃根、茎，吃水果只吃果肉，而把果皮、果核、果瓤、果籽丢弃不食，但在这些丢弃的部分中，却含有丰富的维他命、矿物质、纤维素和植物生化素。其中，植物生化素是植物自然分泌的化合物，是保护植物生命的重要防卫系统，长期摄取植物生化素，可抗氧化、消除自由基，延缓老化、提振精神。因此“全食族”讲究吃东西时要“连皮带籽”，尽量摄取保持原始状态的食物，食用完整的食物，从而获取全部的营养。
但食物并不是所有的营养都在皮和籽里，刻意追求“完整的食物”其实完全没有必要。虽然不少人在吃东西时会有误区，但只要一天的食物按照平衡膳食宝塔的推荐来吃，基本上还是能满足人体的营养需求。到目前为止，还没有一种病是因为吃皮或是不吃皮的原因而引起。
并非所有食物都适合“全食”，吃果皮或籽营养摄取十分有限
有些食物的确是可以完全食用的，比如芹菜、莴笋等，有些人只吃茎不吃叶，但并非所有食物都适合“全食”。植物的一些部分长期以来人们不吃，是因为它们作为食物有某方面的不足。某种特定的植物的某个部分被发现可能含有以前没注意到的某种营养成分，这有可能，但推而广之，说各种植物都要“全食”，就有点瞎扯了。因为很多植物的某些部分含有大量植酸、单宁等，甚至是“反营养物质”。
葡萄皮中含有丰富的白藜芦醇，不仅能预防心脑血管疾病，还有极强的抗癌能力。而葡萄籽中含有大量多酚类物质如黄酮类物质、原花青素等，都是强抗氧化剂，抗衰老能力是维生素C的30倍、维生素e的50倍。但如果想单靠一次或几次食用整个葡萄就能达到以上效果，几乎不太可能。就拿葡萄籽的抗氧化作用来说，并不是直接吞食一些葡萄籽就能达到效果，真要让其发挥功效，必须要经过一系列的提纯处理。同样，果皮中的营养摄取起来也十分有限。
“全食族”难过营养吸收和食品安全两道关
果皮虽有一定营养，但也有农药。因此“全食族”的食物必须是绿色纯天然的，不打农药和上蜡的，另外。“全食物”虽然好，但只凭人体自身的咀嚼功能，是无法完全把蔬果纤维中的细胞壁嚼碎，并吸收那些藏在皮、核、籽、根、茎的细胞壁中的天然营养。因此，“全食族”们还需经过“营养吸收”和“食品安全”两道关卡。被人们热捧的香蕉皮对胃肠道有一些作用，但香蕉如果时间放长了的话，色素也会发生变化，也会导致霉菌的滋生。有清暑、解热、止渴、利小便功效的“西瓜翠衣”，并不是完全意义上的西瓜皮，而是用刨刀将表皮青色含有蜡质的青皮层刨下，晒干，即为西瓜翠衣。
肠胃功能不佳者切莫尝试吃“全食”
葡萄糖在农作物的功效篇4
葡萄的营养成分
用鲜血换回来的葡萄，又含有哪些营养呢?其实葡萄是一种营养价值较高的水果，每100克可食部分中含有水分88.7克、蛋白质0.5克、脂肪0.2克、膳食纤维0.4克、碳水化合物9.9克、钙5毫克、磷13毫克、铁0.4毫克、锌0.18毫克、胡萝卜素50微克、维生素B10.04毫克，维生素B20.02毫克、尼克酸0.2毫克、维生素C25毫克。还含有有机酸、卵磷脂、氨基酸、果胶等成分。
葡萄的食药同源
葡萄酸甜适口，水分多。葡萄中所含的较多的糖分中，大部分是容易被人体直接吸收的葡萄糖，所以，葡萄成为消化能力较弱者的理想果品。葡萄中含大量酒石酸，有帮助消化的作用，适当吃些葡萄能健脾胃。
祖国传统医学认为，葡萄味甘、酸、性平，入肺、脾、肾经，具有补气血、强筋骨、利小便等功效。适用于气血虚弱、肺虚咳嗽、心悸、盗汗、风湿骨痛、淋病、小便不利等症。据《神农本草经》记载：“主筋骨湿痹，益气倍力强志，令人肥健，耐饥忍风寒，久食轻身不老延年，可作酒。”
现代药理学研究表明，葡萄中的有机酸类和果胶能抑制肠道细菌繁殖，并对肠道有收敛作用。葡萄可减少血管栓塞，降低胆固醇及防止肿瘤的形成。葡萄含单糖不仅可以促进消化，且有保肝作用。葡萄中含有天然聚合苯酚，能与细菌或病毒中的蛋白质化合，使之失去传染疾病的能力。葡萄食疗对于心性、肾性及营养不良性水肿及胃炎、肠炎、痢疾、慢性病毒性肝炎、湿疹、痘疮有辅助治疗作用。
国外科学家曾对葡萄、葡萄叶、葡萄干进行实验，发现它们都有抵抗病毒的能力。葡萄中富含钾盐，含钠量低，有利尿作用。它含丰富的葡萄糖及多种维生素，对改善食欲、保护肝脏、减轻腹水和下肢浮肿的效果明显，还能提高血浆白蛋白，降低转氨酶。葡萄对大脑神经有补益和兴奋作用，对肝炎伴有神经衰弱和疲劳有一定效果。肝炎多伴有食欲差，葡萄可增进食欲，又是肠胃病治疗的有效食品。葡萄干是肝炎患者作为补充铁的重要来源。看来，葡萄对肝脏的益处很大。
葡萄糖在农作物的功效篇5
关键词固定化酶;食品工业;应用
abstractimmobilizedenzymeisthecoreoftheenzymeengineering,itbenefitsthereuseofenzymeandseparationoftheproductionandenzyme,advancestheenzymetechnologylevel.thetechnologyofimmobilizedenzymepromotestheresearchandapplicationofenzymeenginearing.andnowimmobilizedenzymehasbeenwidelyused.theimmobilizedmethodwasintroduced,thentheapplicationofimmobilizedenzymeinfoodindustrywassummarized,andthefutureprospectofthistechnologywasexpoundedintheend.
keywordsimmobilizedenzyme;foodindustry;application
固定化酶技术是20世纪60年展起来的一项生物工程技术。酶的固定化(immobilizationofenzymes)是用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内,进行特有的催化反应,并可回收及重复利用的技术[1]。固定化酶的研究不仅在化学生物学、生物工程医学及生命科学等领域异常活跃,而且因为其节省能源与资源、减少污染的生态环境效应而符合可持续发展的战略要求[2]。
1固定化酶的定义与特点
固定化酶技术是将酶用人工方法固定在特定载体上,进行催化、生产,因而固定化酶一般可以被认为是不溶性酶。与水溶性酶相比,其优点如下:易于将固定化酶与底物、产物分高,便于后续的分离和纯化;可以在较长时间内连续生产;酶的稳定性和最适温度提高;酶反应条件容易控制;可以增加产物的收率,提高产物质量;酶的使用效率高,使用成本低;适于产业化、连续化、自动化生产。与此同时,由于酶的分离、固定化处理等原因,固定化酶也具有一些难以避免的缺点:在固定化过程中,酶活力会损失;生产成本提高,工厂初期投资大;只能用于水溶性底物,适合于小分子;不适宜于多酶反应,还需要需要辅助因子的协助才可以有效反应[3-4]。
2固定化酶的方法
酶的固定方法主要有吸附法、包埋法、共价键合法和一些其他方法,针对不同的酶、不同的载体,需要采用不同的方法,有时还需要将几种方法联合使用。
2.1吸附法
吸附法是通过非特异性物理吸附法或生物物质的特异吸附作用将酶吸附在炭、有机聚合物、玻璃、无机盐、金属氧化物或硅胶等材料上。该方法又分为物理吸附法和离子吸附法。此法简便,且酶变性的可能性较小。但是在酶和载体结合具有弱键的本质,在使用过程中易解吸,又由于载体具有非特异性吸附剂的本质,因此可能同时吸附除酶以外的其他物质[4]。
2.2包埋法
包埋法是指酶或细胞包埋在各种多种载体(如聚丙烯酰胺凝胶、矽酸盐凝胶、藻酸盐、角叉菜聚糖等)中发生聚合、沉淀或凝胶化使之固定的方法。主要分为凝胶包埋法和微胶囊包埋法,该方法操作简单,酶活回收率较高,但发生化学反应时,酶易失活,适用于小分子底物和产物的酶。
2.3结合法
结合法指选择适宜的载体,使之通过共价键或离子键与酶结合在一起的固定方法。包括离子键结合法和共价键结合法。离子键结合法操作简单,条件温和,酶活性损失少,但酶与载体结合力弱,酶易脱落,这也是最常用的方法之一。共价键结合法研究较为成熟,酶与载体结合牢固,一般不轻易脱落,但反应条件较剧烈,会引起酶蛋白空间构象的变化,破坏酶的活性部位。
2.4交联法
交联法是用双功能试剂或多功能试剂进行酶分子之间的交联,是酶分子和双功能试剂或多功能试剂之间形成共价键,得到三向德交联网状结构,除了酶分子之间发生交联外,还存在一定的分子内交联。根据使用条件和添加材料的不同,还能够产生不同物理性质的固定化酶。此法反应条件较剧烈,酶活回收率很低,故不常用。一般将吸附法和交联法2种方法结合起来使用。
3固定化酶在食品工业上的应用
3.1固定化酶在柑橘汁加工中的应用
柑桔加工产品出现过度苦味是柑桔加工业中较重要的问题,苦味物质主要由2类物质组成:一类为柠檬苦素的二萜烯二内酯化合物(a和d环);另一类为果实中多种黄酮苷,其中柚皮苷为葡萄柚和苦橙等柑桔类果汁中的主要黄酮苷,柚皮苷的苦味与鼠李糖和葡萄糖连接键的分子构象有关[5]。主要是利用不同的酶分别作用于柠檬苦素和柚皮苷生成不含苦味的物质。manjon等使用空心玻璃床作为载体,分别使deae-sephadex和单宁-氨基乙基纤维(tanninaminoethy1cellulose)作为载体;puri等使用海藻糖;soures等使用醋酸纤维和三醋酸纤维制成膜固定酶,其试验结果都表明用固定化酶处理后的果汁苦味明显降低。
3.2固定化果胶酶在果汁加工中澄清的应用
在果汁加工中,果胶的存在会使压榨与澄清困难,而果胶酶是指分解果胶物质的多种酶的总称。lozano等[6]将尼龙膜进行o-烷基化活化后与果胶酶共价偶联,然后置于微滤反应器中,被降解的小分子果胶随滤膜流出,贮液粘度降低88.14%,从而破坏果汁的胶体状态。张来群等[7]将尼龙网经3-二甲氨基丙胺活化后,用戊二醛共价偶联果胶酶,所得固定化酶km值与自然酶接近,在较宽的ph值范围内保持正常活力,对温度的稳定性有较大提高。vaillant等[8]以虾壳几丁质为载体,以戊二醛为偶联剂共同固定pl和内切纤维素酶,发现其半衰期为407h。
3.3固定化酶在啤酒澄清中的应用
啤酒以其清晰度高、泡沫适中、营养丰富和口感好成为人们的最佳选择。但是,由于啤酒中含有一定量的蛋白质,它与游离于啤酒中的多酚、单宁等结合产生不溶性胶体或沉淀,造成啤酒混浊,从而严重影响了啤酒的质量。温燕梅等[9]采用吸附—交联法,使胰蛋白酶先吸附于磁性胶体粒子表面,后用戊二醛双功能试剂交联,形成“酶网”裹着载体形成固定化酶,该磁性酶对啤酒澄清防止冷浑浊有明显效果。赵炳超等[10]在戊二醛做交联剂的条件下,以介孔分子筛mcm248作载体固定化木瓜蛋白酶,所得固定化酶的热稳定性有了显著提高,固定化酶的ph值稳定性和储藏稳定性也有了明显改善。
3.4固定化酶在乳制品中的应用
乳糖酶亦称为β-半乳糖苷酶,是工业中应用相当广泛的一种酶,较多地应用于乳制品加工中。很多人小肠黏膜内的乳糖酶活性严重降低,导致乳糖不耐受症。用乳糖酶处理部分乳糖,分解为葡萄糖和半乳糖,可以减少这种症状。
杨君等[11]应用海藻酸钠—壳聚糖固定化乳酸菌进行发酵乳清饮料研究。结果表明,固定化乳酸菌产酸和耐酸能力强,菌种活力持久并可多次重复利用。孙玉梅等[12]埋酵母乳糖酶间歇处理预先超高温消毒的牛奶,用戊二醛处理环状芽孢杆菌的乳糖酶,或把该菌用戊二醛交联固定于多孔硅胶,经处理或固定化后的乳糖酶,其生产活性从原来的21%提高至40%。李燕[13]用聚丙烯酰胺凝胶包埋米曲酶的乳糖酶,酶活力与机械强度都比较理想。固定化酶的稳定性范围扩大,热稳定性提高,同时底物乳糖在凝胶中扩散不影响固定酶的反应速度。使用该固定化酶处理脱脂牛奶,可以在保持原有风味的条件下,增加甜度,饮用时可减少蔗糖用量。
3.5固定化酶在制糖中的应用
在制备低聚果糖中,hayashi等[14]用多孔硅石吸附aureo-basidiumsp.的果糖基转移酶,并用戊二醛交联后装柱可保留较高的酶活力。hayashi等[15]用deae-纤维素固定果糖基转移酶,酶活力可保留95%。yun等将果糖基转移酶固定在苯乙烯衍生的多孔离子交换剂上填入玻璃柱内,初始固定化酶的活性仅丧失8%。chiang等[16]将aspergillusniger和aspergillusjapoicus的果糖基转移酶纯化后共价结合在甲基丙烯酰胺高分子颗粒上,可保留酶活力达100%。
固定化葡萄糖异构酶可以用来催化玉米糖浆和淀粉生产高甜度的高果糖糖浆。用淀粉生产高果糖浆包含3步:一是用淀粉酶液化淀粉;二是用糖化酶将其转化为葡萄糖,即糖化;三是用葡萄糖异构酶将葡萄糖异构为果糖。由此可得到含高果糖浆与蔗糖同等甜度时,其价格低10%~20%,具有经济推动力。该固定化酶常用的制备技术是热处理法,将含葡萄糖异构酶的放线菌、芽孢杆菌或链霉菌等细胞用60~65℃热处理15min,该酶就固定在菌体上制成固定化酶[17]。
3.6固定化酶在茶叶加工中的应用
在茶叶中含有种类繁多的酶,如多酚氧化酶、过氧化酶、单宁酶、果胶酶等,其对茶叶的加工或深加工有重要的意义。对重要酶类的固定化研究,可有效地改善茶叶的品质、拓展茶叶深加工的领域和应用范围。
多酚氧化酶是作为茶叶尤其是红茶必不可少的一种酶,李荣林[18]等人利用海藻酸钠包埋交联后其活力保持不变,而且热稳定性和对酸碱的适应性增强。单宁酶可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚酸键,将单宁酶应用于茶饮料中可改善茶饮料的品质。lauren[19]报道用固定化的单宁酶处理红茶,提高茶汤中可溶性铁和钙的含量。若在绿茶加工中使用单宁酶,可以部分消除夏秋茶的苦涩味道,提高茶饮料品质。茶叶中的水溶性果胶物质,对于促进红茶的品质具有积极作用。尹军锋等[20]用果胶酶对茶汁酶解作用进行研究,得出了果胶酶能提高茶汁膜分离性能的结论。
3.7固定化酶在烟叶中的应用
在烤烟初烤和复烤后尚残留淀粉,淀粉在燃吸时影响燃烧速度和燃烧完全性,并产生糊焦气味,影响吸食品质。在一定条件下淀粉能水解为水溶性糖,使烟质改善。但这些反应并不充分,处理后的烟叶中淀粉含量仍很高,特别是低次烟叶中较高的淀粉含量影响了该类烟叶的可用性。加酶处理能加速淀粉水解,能将直链淀粉迅速降解为糊精和麦芽糖等,糖化酶能将直链淀粉和支链淀粉降解为葡萄糖。刘谋盛等[21]将固定化α-2淀粉酶和糖化酶制成乳状液,用以降低低档次烟叶中淀粉的含量。由于酶被水溶性载体所形成的保护层包膜,避免了与空气直接接触,其活力得以提高,即强化了发酵条件,从而提高了卷烟的抽吸品质。同时,对固定化酶乳状液添加剂与水溶液酶添加剂降低低档次烟叶中淀粉的质量分数进行了研究,结果表明,固定化酶处理烟叶淀粉降解率为25%~30%,优于水溶液酶的25%,特别在抽吸品质方面,前者处理明显优于后者处理。
3.8固定化酶在食品检测以及传感器中的应用
生物传感器被认为是一种由受体、抗体或酶构成的生物感应层于换能器紧密连接而能提供环境组成信息的感应器。如:测量电流以及电位的酶电极,酶热敏电阻装置,以场效应管为基础的生物传感器,以及生物发光及化学发光为基础的纤维—光学传感器等,不同的传感器都应用不同类型的固定化酶。
固定化葡萄糖氧化酶传感器是其中应用最为广泛的一种。1967年,clark等[22]采用固定化酶技术,把葡萄糖氧化酶固定在疏水膜上再和氧电极结合,组装成第1个酶电极—葡萄糖电极。唐芳琼等[23]利用纳米颗粒引入到葡萄糖电极研究中,并用易成膜的pvb作辅助膜基质,进行god的固定化研究。试验结果表明,利用纳米颗粒的表面效应可以显著提高god酶电极响应灵敏度。目前,制药厂将葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶与一种显色剂一起固定在试纸上,制成检验妇女是否妊娠的试纸。这种检测技术简单,操作方便,应用极为广泛。用聚丙烯酰胺包埋葡萄糖氧化酶与氧电极组装成酶电极也可用来进行临床的血糖检测,并且可连续测定1000次血糖样品,低温存放180d仍可保持90%的酶活力。
食品中的农药残留分析越来越受到人们的关注,蔬菜中有机磷农药残留的快速检测已成为目前人们研究的热点。应用有机磷农药对胆碱酯酶特异性抑制的酶化学比色分析法已被广泛应用于有机磷农药的定性、定量检测。于基成等[24]将植物酯酶共价结合到微孔塑料板上,制成农药快速检测板,用于检测有机磷类农药。建立的方法方便、快捷、检测样本容量大,结果能满足蔬菜中有机磷农药残留检测的要求。张淑平等[25]利用固定化的乙酰胆碱酯酶(ache)制作一种可用于农药残留检测的快捷灵敏的传感器,并探讨了ache的固定化技术。固定化酶传感器具有较高的灵敏度和稳定性,该检测方法可以满足对甲萘威农药残留的快速检测要求。
4固定化技术在食品工业中应用的前景和发展
固定化技术在食品工业中的应用还很多,如固定化氨基酰化酶生产l-谷氨酸;固定淀粉酶和葡萄糖淀粉酶以淀粉为原料生产葡萄糖;固定化酶法酿造调味品等,但用于食品工业的酶远远大于固定化酶。还有很多固定化酶和固定化细胞处于中试阶段,固定化原生质克服了固定化细胞的一些缺陷,但固定原生质体还处于研究之中,未用于生产。人们清楚地看到了固定化技术的一些优点,虽然很多还处于研究和开发中,但已经给人们指明发展方向。随着固定化技术的发展,将会有更多的固定化酶、细胞、原生质体应用于生产中,充分显示出固定化技术的优越性,开启固定化技术的新局面。
5参考文献
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葡萄糖在农作物的功效篇6
【摘要】
目的研究氨基葡萄糖的质子化和与Cu2+，Co2+，ni2+的配位性能。方法用pH电位滴定法测定（298±0.1）K，i=0.10mol/LKno3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2+，Co2+，ni2+的二元配合物的生成常数。结果氨基葡萄糖pKa为7.78，配合物生成常数的对数分别为：Cu2+，5.22（110），9.38（120）；Co2+，3.19（110），5.99（120）；ni2+，3.40（110），6.31（120）。结论氨基葡萄糖与Cu2+，Co2+，ni2+配位时不解离出醇羟基质子，不同金属离子配合物生成常数的大小符合irving-william序列。
【关键词】氨基葡萄糖配合物生成常数
abstract：objectivetostudythecoordinationreactionofglucosaminewithCu2+，Co2+andni2+.methodstheprotonationofglucosamineandcomplexformationconstantofglucosaminewithCu2+，Co2+andni2+binarycomplexesweredeterminedat298K，i=0.1mol/LKno3bypHmethod.ResultstheprotonationofglucosaminewaspKa7.78.theformationconstantswereCu2+，5.22(110)，9.38(120);Co2+，3.19(110)，5.99(120);ni2+，3.40(110)，6.31(120).ConclusionprotonofalcoholichydroxyldoesnotdissociatewhencoordinatedtoCu2+，Co2+andni2+.thestabilityofbinarycomplexesaccordwiththeirving-williamorderofmeta1ionsforthesameligand.
Keywords：Glucosamine；Complex；Formationconstant
甲壳素又名几丁质、甲壳质、壳多糖等，是一种广泛存在于甲壳纲动物如蟹、虾、软体动物、昆虫及高等植物细胞壁中的线性氨基多糖，其资源丰富，是自然界除蛋白质外数量最大的含氮天然有机高分子，广泛应用于工业、农业、医药、环保及健康领域［1］。甲壳素主要组成单位是n-乙酰-D-氨基葡萄糖，经盐酸水解可生成D-氨基葡萄糖盐酸盐。氨基葡萄糖作为甲壳素的最终水解产物，是一种天然的氨基单糖，并存在于人体特别是关节软骨中，是关节软骨中蛋白多糖的组成成分。研究表明，氨基葡萄糖及其盐酸盐可以有效地抑制白血病细胞K562的生长［2］。和一些具有膜活性的药物相结合具有较好的抗癌活性。临床上用于治疗骨关节炎［3］。D-氨基葡萄糖分子中含有－oH和－nH2，具有螯合金属离子的作用，其金属配合物具有水溶性好、低毒、甚至无毒的性质以及抗菌、抑制细胞生长的作用。尽管氨基葡萄糖具有重要的生理活性，但对其性质研究不多，目前，有关金属离子与氨基葡萄糖盐酸盐，氨基葡萄糖席夫碱和n-乙酰氨基葡萄糖的配合物的合成［4，5］、抗菌活性［6］及与Dna的作用［7］研究时有报道，但有关氨基葡萄糖与金属离子形成配合物的稳定性研究甚少。本文通过pH电位滴定法，测定了（298±0.1）K，i=0.10mol/LKno3条件下氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2+，Co2+，ni2+的二元配合物的稳定常数，为开发利用甲壳素生物资源，了解氨基葡萄糖的生理功能提供理论参考。
1仪器及试剂
1.1仪器
意大利HannapH213型酸度计（精度0.001pH），Hi1131复合电极。Shimadzu超级恒温水槽（精度0.1℃）。
1.2试剂氨基葡萄糖（sigma公司），氢氧化钠、硝酸、硝酸钾等为国产分析纯试剂，eDta、邻苯二甲酸氢钾为基准试剂；0.01025mol/LCu2+、0.01069mol/LCo2+，和0.01100mol/Lni2+离子溶液的浓度分别用eDta标准溶液标定；用常规方法配置无Co2的naoH溶液，其准确浓度用邻苯二甲酸氢钾基准物质标定为0.1879mol/L；1.0mol/LKno3溶液由称量法直接配制。
2方法及结果
首先用4种标准缓冲溶液(pH值各为4.003，6.864，9.182，12.454)校正pH计，实验在串联于超级恒温槽上的夹壁容器内在高纯氮气保护下进行，用已除去Co2的氢氧化钠溶液滴定氨基葡萄糖质子化常数和氨基葡萄糖与Cu2+，Co2+，ni2+所形成的二元配合物溶液，在30.00ml滴定溶液体系中，金属离子浓度为1.0×10-3mol/L，氨基葡萄糖浓度为2.0×10-3mol/L，实验条件为（298±0.1）K，离子强度i=0.10mol/LKno3。实验溶液均用二次水配制．每组实验至少平行3次，稳定常数的计算用孙宏伟（1998南开大学博士论文——邻菲罗啉掺联多胺配合物的热力学、动力学研究）提供的SCmaR程序在微机上计算。该程序是对titFit程序的改进，收敛范围更为广泛。
实验测定的氨基葡萄糖的质子化常数及与Cu2+，Co2+，ni2+二元配合物的稳定常数见表1。表1Cu2+，Co2+，ni2+与氨基葡萄糖配合物的配位反应及其稳定常数
〔（298±0.1）K，i=0.10mol/LKno3〕（略）
3讨论
氨基葡萄糖的结构式见图1。
分子中2位碳上有一个伯氨基，在水溶液中可发生一级质子化过程，经测定，氨基的质子化常数为7.78，测定结果与文献值一致［8］。其质子化常数小于其它的有机伯胺，即氨基葡萄糖的氨基碱性弱于其它的有机伯胺，这可能是由于氨基葡萄糖中的氨基受邻位半缩醛结构的吸电子效应影响的结果。
在所研究的配位体系中，经计算机拟合，氨基葡萄糖与Cu2+，Coi2+，ni2+均能形成组成为（110）和（120）的配合物(括号内的3个数字分别代表配合物中金属离子、配体及所结合的质子数)，即1：1和1：2的配合物，各组成的配合物的稳定常数见表1。
文献［4，9］制备了氨基葡萄糖与铁（Ⅱ）、锌（Ⅱ）、钴（Ⅱ）、铜（Ⅱ）的配合物，并通过红外光谱，研究了这些配合物的配位性能，红外光谱特征证明，氨基葡萄糖分子中的氨基和仲羟基参与了与金属离子的配位。本研究显示，在仲羟基配位时，并没有解离出质子，这与文献结果是一致的。据此，氨基葡萄糖与Cu2+，Co2+，ni2+的配位反应和配合物的结构见图2。
本文所研究的金属离子配合物的稳定常数钴(Ⅱ)
本研究结果与文献结果［8］对比发现，配位模式与文献一致，即各金属离子都与氨基葡萄糖形成1：1和1：2的配合物，铜配合物的生成常数与文献一致（文献值110：5.17，120：9.26），但钴(Ⅱ)、镍(Ⅱ)配合物的生成常数明显大于文献值，文献值为钴(Ⅱ)igβ110=1.71，igβ120=4.76；镍(Ⅱ)igβ110=2.65，igβ120=5.61。比较文献测定值发现，钴(Ⅱ)、镍(Ⅱ)的1:2配合物的生成常数（igβ120－igβ110）均大于1:1配合物的生成常数，这意味着当金属离子和氨基葡萄糖生成了1：1的配合物后，更容易再和另一个氨基葡萄糖分子配位，其配位能力强于游离的金属离子，这在理论上是无法解释的，加之钴、镍的配位体系的稳定常数较小，文献方法未经计算机拟合，其可信程度较低。因此我们认为，本文采用pH电位滴定方法，利用计算机程序拟合，其结果是先进的、可靠的。
参考文献
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葡萄糖在农作物的功效篇7
最近发表于《纽约时报》的文章，介绍了杰弗里·韦斯特和路易斯·贝特科特等人的研究。这些理论物理学家认为他们发现了城市存在的原因，揭示了城市中足以补偿高房租和害虫蔓延的社会经济学效益。
人类是地球上最高级的动物，拥有最智慧的大脑和最先进的科技，却常常奈何不了家里那些带来危害的小小害虫。
其实，“害虫”这个词是站在人类的角度看的，在农业出现之前，昆虫只是吃着自己食谱里的食物。慢慢地，它们惊喜地发现，有一些地方突然长满自己爱吃的植物，于是纷纷抢驻伊甸园。谁知，这个伊甸园的缔造者——人类，给它们扣上了“害虫”的帽子。
为了能在伊甸园生存下去，害虫们也进行着艰苦的自我改造。它们的抗药性越来越强，繁殖力也越来越强。近年来，由于气候变暖，很多害虫的冬眠习性被改变，它们变得可以四季不间断地发育繁殖，因而造成“大爆发”局面。
不得不承认，在与人类的斗争中，它们才是进化的赢家。
进化赢家：超级“小强”
自然界中存在着这样一群“小强”，它们能“抵制”糖分诱惑，从而绕过灭蟑螂药的陷阱。现在，科学家终于弄清了这其中的神经科学原理。美国北卡罗来纳州立大学的胜又凌子（ayakowade-Katesumata）等3位研究者，在《科学》杂志上论述了他们的研究，对于这群厌葡萄糖小蠊而言，葡萄糖会触发苦味感受器，且作用强烈。
“这让厌葡萄糖小蠊在测试中‘闭着嘴’从葡萄糖所在的位置跑走。”研究者科比·舍尔（CobySchal）评论说。不仅如此，如果硬塞葡萄糖给厌葡萄糖小蠊吃，它们就会把葡萄糖吐出来，跟小孩子吐难吃的药一样。
研究测试的是一种叫德国小蠊的蟑螂。灭蟑药中的玉米糖浆同时含有葡萄糖和果糖，厌葡萄糖小蠊也就因此不会被灭蟑药引上钩。不仅如此，即使没有蟑螂药，只是单纯的葡萄糖，在厌葡萄糖小蠊尝起来也是苦的。“我们只能从蟑螂的特定神经元的行为和活动中得知它们的感觉。”科比·舍尔在接受果壳网采访时说，“纯葡萄糖对厌葡萄糖蟑螂的味觉表现是‘苦’的。”而对于正常的蟑螂而言，它们不仅乐意吃果糖，也愿意吃葡萄糖。
“大部分情况下，基因突变会让物种丧失一部分功能，”舍尔说，“但这次的基因突变却创造了新的功能：让葡萄糖触发苦味感受器。这也让蟑螂有了这个独特的适应。”在人类和蟑螂的斗争中，“这些蟑螂先我们一步”。
选择难题：杀或不杀？
1940年，南加州的卡梅丽塔斯国民住宅完工后大张旗鼓地搞了一个仪式。仪式上星条旗随着乐队演奏的美国国歌缓缓升起，演讲者大声颂扬着这种“新的生活设计”，新来的住户写文章宣称“山姆大叔是我的房东”，这片住宅区曾开了解决经济大萧条期市民住房问题的先河。
20年后，公共健康部门通告了一个逐渐出现的令人不安的状况：这片区域内的甲型肝炎患者中差不多有40%住在卡梅丽塔斯国民住宅中。正好在那段时间，加利福尼亚大学洛杉矶分校（UCLa）的一个科研小组开发出了一种相对来说更安全的新式杀虫剂。这种被他们称为“氟硅杀”的药物里含有二氧化硅粉末，能够破坏蟑螂的蜡质外皮，导致它们干燥致死。UCLa科研小组在卡梅丽塔斯国民住宅区中试验了这种杀虫剂，获得了吃惊的效果：70%的蟑螂掉了。而在这之后，周围社区里的甲型肝炎患者持续增多，但这种疾病在这个国民住宅区内却几乎消失了。摆脱了蟑螂的骚扰后，这片社区里的居民从一种可怕的病魔手中逃了出来。
“蟑螂是最可畏的昆虫之一。”加利福尼亚大学洛杉矶分校的巴里·塔希斯介绍道，“但有人认为这仅仅是一个偏见，只是因为人们认为它们经常和污秽之物打交道，又难以消灭，看起来还很恶心。而现在我们已经有足够的证据证明人类讨厌蟑螂并不仅仅是一个偏见。”
有“富贵虫”之称的蟑螂，对于城市居民正常生活的影响和危害目前已经超过了蚊蝇，而在城市家庭害虫中名列第一。随着经济贸易发展与货物运输增加，蟑螂异地扩散在加速。而城市化进程加快与人们生活水平提高，又使得蟑螂适宜的生存环境快速扩展。20多年前，蟑螂栖息地带主要是宾馆、饭店、医院等特殊场所。近10年来，蟑螂越来越多地侵入了居民家庭。
据介绍，目前我国城市中蟑螂种类主要有德国小蠊、美洲大蠊、黑胸大蠊、澳洲大蠊、褐斑大蠊、日本大蠊等。在北京等北方城市，繁殖极快的德国小蠊占95%以上。蟑螂昼伏夜出，会飞擅爬，75%的时间躲藏于各类缝隙，一次即可终生繁殖。蟑螂卵封存在卵鞘中，即使雌蟑螂死了，未破坏的卵鞘仍然可繁殖出小蟑螂。
葡萄糖在农作物的功效篇8
对红酒中的单宁感到生涩、受不了干白酒里过高酸味的人，或者第一次和葡萄酒接触的读者，可以从这些微甜的白酒开始。
――摘自《法国人的酒窝》
继去年11月份在北京举办的“波尔多甜酒及贵腐酒大师品鉴班”活动以后，由法国波尔多甜酒协会主办，法国克洛维斯・美酒之旅公司承办，本刊作为重要媒体支持之一终于迎来了一大波巡展活动，首站设在了2015年春季糖酒会的举办地成都，紧接着便是杭州、南京和上海共四个重点城市。
这次巡展共10多家波尔多贵腐酒的庄主们在波尔多甜酒协会主席菲利普和负责人艾玛的带领下，给大家详细讲述这被称为“液体黄金”的贵腐酒起源、风土、制作工艺还有最重要的配餐技巧。其中，最大的亮点在于这次活动阵容强大，有两家1855一级庄会加入：哈宝庄园ChateauRabaudpromise，芝路庄园ChateauGuiraud，还有一家二级庄ChateauCantegril。
甜酒的忠实fans们躁动起来吧，体验一场关于甜酒惊心动魄的不平凡。
波尔多甜白产区的光环
在去成都大师班品鉴班之前，先做一点知识普及会来的比较痛快。
首先我们先要了解波尔多甜白产区，波尔多甜白产区主要位于波尔多城南30公里以外的加龙河两岸，面积总共4040公顷，其间分布着530家酒庄，年产量1200万升（合1500万瓶），只占波尔多葡萄酒总产量的2%。但是，低产量却是高质量的保证。波尔多甜白产区平均每公顷只能产出4000瓶贵腐酒，仅有波尔多普通葡萄酒的每公顷年产量的五分之一到四分之一。
早前我们介绍过波尔多甜白产区的11个子产区。位于加龙河左岸的有苏玳、巴萨克、超级格拉芙、西龙四个产区；位于加龙河右岸的有卢皮亚克、圣十字山、卡迪拉克、波尔多一级丘、圣马凯尔五个产区。左岸气候更适合贵腐菌的生长，所产的贵腐酒口感更为圆润醇厚；右岸雾气相对于左岸较少，生产的贵腐甜酒的口感通常更为清爽。另外有两个产区比较例外，圣福日位于多尔多涅河左岸，超级波尔多可以来自于整个的波尔多产区。根据法国法定产区（aoC）的认证制度，这11个子产区都可以使用“波尔多甜白”的名称。
1855年，为准备在巴黎举行的第三届世界博览会，法国政府委托波尔多葡萄酒行业协会对波尔多产区的葡萄酒庄园进行认定分级。61家红葡萄酒酒庄入选榜单，并被划分为5个等级。27家波尔多甜白也入选了列级酒庄，被单独划分为三个等级：一级庄（premiercruclassé）有11家，二级庄（deuxièmecruclassé）有12家，出类拔萃的滴金酒庄（Chateaud’Yquem）被评为“一级特等”（premiercrusupérieurclassé）。跟红葡萄酒一样，白葡萄酒列级也是其卓越品质的象征。并且，白葡萄酒的列级榜单产生一个半世纪以来就一直没变过，而红葡萄酒的榜单却经历过两次变动。这足以说明波尔多甜白在消费者中超级稳固的口碑。
当然，波尔多甜白产区也不都是昂贵的名庄佳酿，还有很多性价比很高的中档位美酒，也有适合随时随意享用的“小清新”。多样的风土造就了多样的风格和多样的价格，消费者可以根据自己的喜好进行选择。近年来波尔多甜白产区开始有意摆脱“高大上”形象定位，越来越倾向于走亲民路线。从2009年开始，11个法定产区的酒庄设立“波尔多甜白”（SweetBordeaux）组织，联合向大众推广它多元的风格。他们一方面积极地走出去，到中国等新兴市场中进行产品推介会，让更多的消费者了解波尔多甜白产区；另一方面在波尔多举行音乐、艺术等关于葡萄酒的文化活动，还推出多条波尔多甜白的观光路线，吸引游客来到历史悠久、旅游资源丰富的波尔多，在轻松愉悦的氛围中享用波尔多甜白葡萄酒。
名副其实的贵族酒
接下来我们说说波尔多甜白中的“公主”――贵腐酒。这位名副其实的贵族确实“有料”，不信你看看人家的本事儿。
波尔多甜白之“腐”
所有贵腐酒都离不开贵腐菌（Botrytiscinerea）。贵腐菌就是灰霉菌，它若附着在尚未成熟的葡萄皮上，则会导致葡萄的腐烂，酒农们唯恐避之不及；它若生长于已经成熟的葡萄皮上，则成为酒农追捧的“高贵的腐败者”。成熟的葡萄在感染灰霉菌后，果皮会逐渐呈现棕色甚至深暗色，果肉也会出现一定程度的“腐烂”，成为一肚子坏水的“烂葡萄”。由于葡萄皮被灰霉菌刺穿，果肉的水分会透过果皮部分蒸发，失水的葡萄果粒逐渐塌陷，果皮也会出现烘烤装的褶皱，甚至伴随灰色的“丝状物”。这种看来让人有些恶心的“坏葡萄”才是酿制贵腐酒的关键。贵腐菌使葡萄的糖分和风味物质高度浓缩，还会降低葡萄的酸度，部分改变了葡萄的成分。采用感染贵腐菌的葡萄榨汁酿造的葡萄酒不仅味道更醇厚，还会有其他甜酒所不具备的奇特口味，真可谓化腐朽为神奇。
贵腐菌对于很多经典甜酒的酿造起到至关重要的作用，其中包括苏玳（Sauternes）甜白、匈牙利托卡伊（tokaji）、德国和奥地利的Ba、tBa甜酒等。当贵腐菌感染了健康成熟的葡萄时，贵腐菌的菌丝会穿透葡萄皮，吸取葡萄内部的水分和糖分，这样葡萄皮上就相当于布满了一个个的小气孔，非常有利于水分的蒸发渗出。被贵腐菌感染的葡萄虽然果粒也有部分腐烂，但是大部分葡萄并没有腐烂，相反因为水分的渗出而大幅提升葡萄的糖分含量，葡萄中的香气也会更加浓郁。
葡萄成功感染贵腐菌是诸多要素的综合。首先必须保证葡萄在生长期间可以完美成熟，紧接着葡萄在感染贵腐菌的每一天里，需要有潮湿雾霾的早晨促进贵腐菌的生长蔓延，还需要有干燥晴好的白天让葡萄中的水分尽快蒸发出来。这样的天气条件只在极其少数的葡萄酒产区出现，而且并不是每年都可以出现。
波尔多甜白之“贵”
波尔多贵腐酒之“贵”首先在于其产量的稀少。灰霉菌的生长离不开湿润的环境，但过于潮湿又会使葡萄全部烂掉。一般来说，上午需要有湿润的雾气，中午有微风吹走雾气，午后有温暖的阳光把葡萄重新晒干。这样的微气候纯属天造地设，只有在临近河谷的特定小区域存在，因此贵腐酒必然是“限量版”。即使在这样的微气候中，贵腐现象的发生也不是必然的。某些年份，“贵腐”现象没有发生或发生范围很小，根本无法生产贵腐酒。比如，苏玳地区如果幸运的话，贵腐菌最多两年一遇。即使贵腐现象如期而至，如果收获季节秋雨绵绵，贵腐菌又会变成导致葡萄腐烂的灰霉菌，酒农的希望又会在无奈中化为泡影。另外，贵腐酒还贵在昂贵的人工成本。酒农需要多次穿梭于葡萄园中，根据葡萄感染贵腐菌的程度精心挑选。物以稀为贵，加上手工劳作的成本，波尔多甜白之“贵”就不足为奇了。
波尔多甜白之“甜”
贵腐酒是葡萄酒甜酒家族的重要成员。所有甜酒的秘诀都在于酒精发酵结束后糖分的留存。酒精发酵是酵母将葡萄汁中的糖分转化为酒精的过程（同时释放出二氧化碳和热量）。酵母菌是一种“醉生梦死”的可爱小生物。它跟某些人类一样对糖分没有任何抵制力，一生致力于吃掉它周围所有的糖分。可它的“酒量”并不高，在酒精度达到15-16度的时候，就会在甜蜜的美梦中被自己制造的酒精杀死。在普通葡萄酒的酒精发酵中，酵母菌在理论上是可以将糖分全部转化为酒精的。但贵腐葡萄的葡萄汁高度浓缩，发酵过程中酒精度达到15-16度后仍然会有大量的糖分剩余，生产出来的葡萄酒自然就会很甜。
甜“秘密”
感谢大自然的恩赐，波尔多甜白产区具备了贵腐酒生产的最佳条件。勤劳聪慧的波尔多人也不负老天的厚爱，充分利用了得天独厚的条件，酿造出伟大的波尔多贵腐酒。
微气候
小溪一般蜿蜒的西龙河（Cerons）是加龙河（Garonne）的一条支流。加龙河的水温较低，西龙河汇入加龙河时产生升腾的水汽，这些水汽会生成湿润的晨雾。两条河流交汇的南部的森林也会增加空气的湿度。到了葡萄成熟的凉爽秋季。贵腐菌可以在成熟的葡萄上繁殖。午后温暖干燥的东风吹走了雾气，下午后阳光普照，葡萄又不会全部烂掉。这样的微气候是贵腐菌生长的天堂。
葡萄品种
能够生产贵腐酒的葡萄首先要“脸皮儿薄”，贵腐菌是没有办法顺利穿透厚脸皮的葡萄的。在波尔多符合贵腐酒生产要求的有赛美蓉、长相思和密斯卡岱三种葡萄。赛美蓉是波尔多种植面积最广泛的葡萄品种（约占总面积的80%），它饱满，生产出的葡萄酒色泽金黄，酒体饱满，具有蜂蜜和奶油的香气，陈年潜力巨大。长相思具有清爽感与活力，生产出来的贵腐酒具有柑橘、热带水果和花香等香气，它高酸的特点能为混酿酒营造出平衡的结构。密斯卡岱能酿制出酸度较低的精致葡萄酒，而且具有麝香感和丰富的花香。
土壤和风土
这里的土壤类型是砂砾土地、石灰质土地和黏质土地。吉龙河左岸土质为砾石、石灰质或者黏土―石灰质，右岸土质为黏土―石灰质、黏土―砾石或者沙质。这样的土质适宜赛美蓉、长相思和密斯卡岱三种葡萄的生长，石灰质还会增添葡萄酒中矿物质的味道。这里的风土也非常出色。河流的冲刷侵蚀形成了众多和缓的小山丘，葡萄园一般位于山谷和山坡上，朝南或西南，给葡萄生长提供了理想的日照，也营造了贵腐菌生长的理想地理条件。
采摘方式
感染贵腐菌的葡萄成熟很不规律，酒农只能采取选择性采摘的方式，逐串逐粒精选合适的葡萄。葡萄采摘的时间非常考究，一定要在霉菌侵蚀到刚好的时候采摘，错过时机整片葡萄田都会被霉菌彻底毁掉。采收从10月1日前后开始，一直持续到11月份，甚至12月。酒农要在田间进行五六次的采摘，有的要达到十次之多。这是一件及其耗费人工的工作，并且只有经验丰富的酒农才能胜任。为保证采收质量，一些庄园世代雇佣同一家族的人员进行葡萄采收。
酿制工艺
采收回来的葡萄一般都是通过不同的酿造方法酿造葡萄酒：第一种方法是使用含糖量高的葡萄，这样在葡萄酒正常发酵完成后，还残留很高的糖分，比如苏玳地区的甜酒，使用感染过贵腐霉，糖分高度浓缩的葡萄酿造，法国汝拉地区的稻草酒（Vindepaille），是将葡萄阴干，去除部分水分，从而得到含糖量更高的葡萄。德国以及加拿大最有名的冰酒，是在零下8度的时候采摘，在葡萄里面水分结冰的情况下，压榨出含糖量高的葡萄汁。一般要在8摄氏度进行低温压榨。首先是轻轻地压榨让液汁流出，然后调整压榨机进行再次压榨获取充足的糖分。整个压榨过程都要加倍小心，避免种子破碎造成苦涩的味道。经过一夜的沉淀澄清后，温度保持在20-22摄氏度，使用当地酵母，在酿酒罐或橡木桶中进行缓慢发酵。在酒精与糖分达到平衡后，发酵结束。然后用小酿酒桶进行陈酿。陈酿时间一般长约18个月到两年，有的达到3年，最终达到酒与橡木的单宁和香气完美结合。在整个酿制过程中，酿酒师像对待自己的孩子一样尽心尽责，又像对待艺术品一样认真虔诚。第二种酿制甜酒的方法，就是在糖分未完全转化成酒精的时候，在中途使用人工的方法中止发酵，例如降低温度、加入二氧化硫或者酒精杀死酵母，这样会得到期望甜度的甜酒。还有一种酿造廉价甜酒的方法，是在发酵好的白葡萄酒中加入未发酵的甜葡萄酒汁，这样就得到香甜可口低酒精度的甜酒了，最常见的这类甜酒如德国的圣母之乳。
波尔多甜白的配餐
波尔多甜白可以搭配多种西餐食物。在小吃类中，波尔多甜白可以搭配火腿、香肠、鸭肉酱、熏鱼、芦笋等。在头盘中，波尔多甜白非常适合各类海鲜食物，比如三文鱼、金枪鱼、扇贝、牡蛎、龙虾等；它与各种鸡肉、鸭肉等禽类白肉也是绝配。波尔多甜白还很适合与奶酪搭配，除了一般的硬奶酪，那种味道奇特的蓝奶酪更能激发出波尔多甜白味道的丰富性。至于甜点，大家都知道甜酒配甜食，水果沙拉、蛋挞、干无花果、黑巧克力等都是波尔多甜白的好朋友。
对葡萄酒爱好者来说，贵腐酒本身就是一道很好的甜点，蜂蜜、杏脯和桃子的果香包裹着那贵腐菌特有的香气从鼻腔到口腔，平衡的酸度让酒浓而不腻。对于这样的贵腐酒，该怎么喝呢？贵腐葡萄酒其实是随时随地都可以享用的。餐前可做开胃酒，而它和香料丰富的菜系例如川菜、湘菜、泰国菜都可以很好地搭配，因为甜能解辣，另外还可以与甜品搭配，甜上加甜，相得益彰。由于贵腐酒甜度非常高，所以建议适宜饮用温度为6℃～12℃。
葡萄糖在农作物的功效篇9
很多市民在选择鸡蛋的时候,喜欢选择价格较贵的“土鸡蛋”,而不愿选择价格稍便宜的“洋鸡蛋”,理由是土鸡蛋比洋鸡蛋营养好。其实,这种认识有失偏颇。土鸡蛋和洋鸡蛋营养价值各有千秋,从食品安全角度来看,洋鸡蛋还要占一些优势,只不过土鸡蛋更符合国人的口味而已。
所谓土鸡蛋,是指土鸡生下的蛋。真正意义上的土鸡应该是完全散养的,每天在林地里活动觅食,只吃虫子、野草等天然食物。这种鸡因为营养不均衡,下的蛋个头比较小,但因为土鸡吃绿叶菜较多,蛋黄中的类胡萝卜素和维生素B2含量高,因此蛋黄更大,颜色更深一些。由于土鸡饲养时间较长,所含可溶性物质较多,如5-黄嘌呤核苷酸一类,溶于唾液刺激舌面味蕾,即滋味感,所以人们感到土鸡蛋味道鲜美。但是,农家散养的土鸡经常有机会接触农药、化肥、杀虫剂等化学用品,其遭受化学污染的危险性可能高于鸡场所产的鸡蛋。
所谓洋鸡,是指养鸡场里饲养的“快火鸡”,生产周期短,这种鸡产下的蛋被称为洋鸡蛋。鸡场里饲养的洋鸡所吃的饲料都是经过科学配比的,营养素含量全面均衡,因此产出的蛋中,铁、钙、镁等矿物质元素的含量都高于土鸡蛋。另外,洋鸡所吃的饲料中添加了一定量的膳食纤维,使得蛋黄中的胆固醇和脂肪含量比土鸡蛋低很多,更适合老年人食用。
值得注意的是,土鸡蛋主要来自于散养农户,有些居心不良者,为了增加鸡蛋产量或者防治禽类患病,给鸡吃含有激素或者抗生素的饲料,其产下的蛋含有激素或者抗生素,吃了有害于人体健康。因此,购买土鸡蛋应该到正规的商场。对小贩出售的便宜土鸡蛋,应该谨慎对待。
上床萝卜下床姜
民间谚语:“上床萝卜下床姜”。“早上吃姜,胜过吃参汤;晚上吃姜,似吃砒霜。”
这是为什么呢?
生姜含挥发油,可加速血液循环。同时含有姜辣素,具有刺激胃液分泌、兴奋肠道、促进消化的功能。中医认为,姜味辛辣,性温,人在清晨之时,胃中之气有待升发,吃点姜可以健脾温胃,鼓舞阳气升腾。到夜间,人身之气应该是阳气收敛、阴气外盛,这时吃姜就违反生理规律。与生姜相反,萝卜性凉,败火清热,下气消食。劳累一天,吃点萝卜,润喉消食,清虚燥之热,有利于休息。
(湖南副主任医师邓向雷)
想长寿多吃葡萄干
葡萄干是大家都不陌生的食物,因为营养丰富,口味甜美,受到了各个年龄层的喜爱。有研究表明,葡萄干中含有葡萄糖、果糖、蔗糖、木糖、多种维生素以及铬、钙、磷、铁等等,对老年人而言更具有营养价值,平时多吃葡萄干,也是一种简单易行的长寿之道。
葡萄糖在农作物的功效篇10
>>药用真菌桦褐孔菌的研究进展桦褐孔菌菌株遗传多样性的iSSR分析桦褐孔菌原生质体制备与再生桦褐孔菌多糖对小鼠抗氧化清除自由基作用的研究褐飞虱aBCG基因的克隆与表达分析褐孔菌属药用真菌化学成分与药理作用研究纂要黄鳝α―L―岩藻糖苷酶基因克隆及其在雌雄个体间的表达分析中国野生毛葡萄病原菌诱导响应VqCoi1基因的克隆及表达分析葡萄糖苷酶抑制剂市场浅析麦冬寡糖的提取纯化及抑制α―葡萄糖苷酶活性的研究黄芩葡萄糖醛酸水解酶基因的克隆、生物信息学分析及表达中药有效成分对α－葡萄糖苷酶活性影响的研究油茶饼粕多糖对体外α葡萄糖苷酶的抑制作用桑树中α—葡萄糖苷酶抑制剂对桑饲料功能的影响n―乙酰―β―D―氨基葡萄糖苷酶的研究现状褐飞虱R2D2基因的克隆及表达分析骨碎补对牙龈卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶和糖苷酶活性的抑制作用顺口溜巧记“根瘤菌和圆褐固氮菌”的特点α-葡萄糖苷酶抑制剂和其他口服降血糖药物的相互作用儿茶素eGCG对Caco―2细胞α―葡萄糖苷酶活性的抑制作用研究常见问题解答当前所在位置：l）进行亚细胞定位；利用interproScan5（http：//ebi.ac.uk/tools/pfa/iprscan5）预测蛋白质的保守结构域和功能域。
1.7实时荧光定量pCR分析
以桦褐孔菌CYp（cyclophilin）基因和aCt（βactin）基因作为内参基因。使用primerpremier5.0设计BGL基因和内参基因所需的荧光定量引物，分别为BGLF和BGLR、CYpF和CYpR、aCtF和aCtR（表1）。以5倍稀释的cDna为模板，在实时荧光定量pCR仪（mx3005p，美国agilent公司）上进行pCR扩增。根据SYBRpremixextaqtm（tliRnaseHplus）试剂盒（大连宝生物公司）配置20μL反应体系：2×SYBRpremixextaqtm10μL，上、下游引物（10μmol/L）0.4μL，cDna模板2μL，无菌水7.2μL。反应程序为：95℃预变性30s；95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸30s，40个循环。反应结束后做熔解曲线分析。每个样品3次重复。根据2-ΔΔCt法计算基因的相对表达量，通过excel2013软件进行绘图。
a～e分别表示培养110，130，150，170，190天；箭头指示取样部位
a～e110，130，150，170，190d；arrowsindicatethesamplingsites
图1培养时间及取样部位
Fig.1LocationofRtpCRsamplingsitesatdifferentstagesofi.obliquussclerotiumdifferentiation
2结果与分析
2.1ioBGL基因的克隆与分析
用简并引物进行pCR扩增后，获得1条230bp的中间片段，该片段与nCBi中已登录的其它真菌的BGL基因片段比对，具有较高的同源性，因此推断该片段是ioBGL基因的部分序列。根据获得的中间片段设计RaCe特异性引物进行pCR扩增，5′端获得1条长度为745bp的基因片段（图2B1），3′端获得1条长度为2135bp的基因片段（图2B2）。序列拼接获得1条2719bp的基因序列，序列分析表明，该基因序列包含2583bp的开放阅读框，编码810个氨基酸，理论等电点为5.57，推测分子量为93.4kD，稳定系数（instabilityindex）为29.72，属于稳定性蛋白。根据该序列设计全长引物，以基因组Dna和cDna为模板，经pCR扩增后，分别获得3382bp和2583bp的全长序列（图2B3、B4），GenBank登录号分别为Kp970550和Kp970549。ioBGL基因的Dna和cDna比对，发现该基因共含有13个内含子和14个外显子（图3），并且只有8个内含子（图3iii、iV、V、Vi、Vii、iX、X和Xiii），符合GtaG原则。
m：Dna分子量；B1：5′RaCe产物；B2：3′RaCe产物；B3：Dna全长扩增产物；B4：cDna全长扩增产物
m：Dnamarker；B1：5′fragment；B2：3′fragment；B3：FulllengthDnaproduct；B4：FulllenghcDnaproduct
图2ioBGL基因克隆电泳图
Fig.2electrophoresisofioBGLgenecloningproducts
方框表示外显子；实线表示内含子；罗马数字表示内含子个数
exonsareshownasboxesandintrons（designatedbyRomannumerals）assolidlines
图3ioBGL基因的结构示意图
Fig.3Distributionofexonsandintronsinthei.obliquusβglucosidasegene
2.2ioBGL基因编码蛋白的生物信息学分析
2.2.1ioBGL编码氨基酸的同源性分析及结构域预测
氨基酸同源性序列比对发现，该基因编码的氨基酸序列与同科的地中海嗜蓝孢孔菌（F.mediterranea）的BGL基因相似性最高（85%），与其它物种，如密褐褶孔菌（Gloeophyllumtrabeum）（67%）、彩色豆马勃（pisolithustinctorius）（66%）、大伏革菌（phlebiopsisgigantea）（65%）、朱红栓菌（trametescinnabarina）（64%）和毛韧革菌（Stereumhirsutum）（63%）的氨基酸序列都具有较高的相似性，表明克隆得到的cDna和Dna序列为ioBGL基因。
蛋白质的保守结构域和功能域预测结果表明，该蛋白属于糖苷酶水解酶第3家族。6323位氨基酸属于糖苷水解酶第3家族的n端结构域；310727位氨基酸为糖苷水解酶第3家族的C-端结构域，该结构域不仅参与催化作用，并且可能涉及到β-葡聚糖的绑定；410551位氨基酸属于pa14结构域，该结构域具有绑定功能；766838位氨基酸为纤维连接蛋白iii型结构域（fibronectintypeiiilikedomain），它的功能目前还不清楚。
2.2.2ioBGL的亚细胞定位预测
信号肽预测表明该蛋白质序列没信号肽序列；预测ioBGL编码的氨基酸序列跨膜区，结果表明该蛋白没有跨膜区；亚细胞定位预测，结果显示该蛋白定位于细胞质的可能性最大，因此推测该基因编码的ioBGL蛋白属于胞内酶。
2.3ioBGL系统进化树分析
将ioBGL与其它相近物种真菌的BGL蛋白进行亲缘关系比对，系统发育树（图4）结果显示，ioBGL和所选取的8个相近物种真菌的BGL蛋白可以划分为5个分支。其中桦褐孔菌（i.obliquus）BGL蛋白和地中海嗜蓝孢孔菌（F.mediterranea）的BGL蛋白亲缘关系较近，聚为1组；密褐褶孔菌（G.trabeum）、毛韧革菌（S.hirsutum）、大伏革菌（p.gigantea）和黄硬皮马勃（Sclerodermacitrinum）聚为1组；印度梨形孢（piriformosporaindica）和皱木耳（auriculariadelicata）分别聚为1组；此外，花耳纲（Dacryopinaxsp.）与伞菌纲的真菌亲缘关系较远，位于距离ioBGL最远的分支中，单独聚为1组。
图4ioBGL蛋白与其它物种ioBGL蛋白的系统进化关系
Fig.4phylogeneticrelatednessofioBGLtootherfungalBGLproteins
2.4ioBGL基因的荧光定量表达分析
为了研究ioBGL基因在菌核发育过程中的表达模式，采用实时荧光定量pCR技术分析其在5个菌核不同发育时期的表达水平的变化。结果（图5）表明，ioBGL基因在菌核发育过程中的表达量呈先升高后降低的趋势。在栽培袋中培养170d的菌核中，ioBGL基因的表达量达到最高，是培养110d菌核中ioBGL基因表达量的3.68倍。DinG[18]等人利用northernblot杂交技术研究BGL基因在子实体形成过程中的表达模式时，发现BGL基因的表达量随着子实体的发育而逐渐增加，与本研究的结果基本一致。
不同小写英文字母表示在p
Differentlowercaselettersindicateasignificantdifferenceatp
图5ioBGL基因在桦褐孔菌不同发育时期菌核
中的表达情况
Fig.5ioBGLexpressionlevelatdifferentstages
ofi.obliquussclerotiumdevelopment
3小结
本研究采用RtpCR和RaCe技术首次从桦褐孔菌中克隆得到的BGL基因的全长序列，并且通过生物信息学分析其编码的氨基酸序列。ioBGL与其它糖苷酶水解酶第3家族中的BGL氨基酸序列比对发现，都包含以下5个保守区：DGp、KHF、SDw、GLD和VLLKn。因此，初步判断ioBGL属于糖苷水解酶第3家族。ioBGL经过多种生物信息学分析，预测其属于胞内酶，胞内BGL水解基质后能够确保产生的葡萄糖不至于流失到胞外，从而提高其利用效率。
由于RtpCR和RaCe技术在克隆基因方面的局限性，本研究只克隆得到一种BGL基因。nCBi已登录物种中，与桦褐孔菌亲缘关系较近的地中海嗜蓝孢孔菌（F.mediterranea）的全基因组测序已经完成，其基因组内具有多种BGL基因。然而，桦褐孔菌中是否还有其它的BGL基因尚不清楚，笔者拟在后续研究中采用其它方法获得更多桦褐孔菌的BGL家族基因，研究其整个家族基因在菌核发育过程中的表达变化规律。
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